штат: | |
---|---|
Набор для обнаружения вируса птичьего гриппа H5/H7/H9/общих подтипов РНК (ПЦР-флуоресцентное зондирование)
【Наименование товара】
Набор для ПЦР в реальном времени для обнаружения вируса птичьего гриппа H5/H7/H9/общий подтип
【Упаковка】
50 комплектов/коробка
【Основные компоненты и содержание】
Имя | Спецификация | Количество |
H5/H7/H9/общий трехвалентный реакционный раствор | 1250 мкл/пробирка | 1 |
H5/H7/H9/общий положительный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
【Хранение и срок годности】
Хранить при -20 ± 5 ℃, повторное замораживание и оттаивание ≤ 3 раза, срок годности 12 месяцев.
【Модель】
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus и другие флуоресцентные усилители для количественной ПЦР.
【Метод испытания】
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Коммерческий набор для выделения РНК можно использовать для выделения нуклеиновых кислот, следуйте инструкциям набора.
2. усиление ПЦР
2.1 Подсчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте в каждую пробирку по 25 мкл реакционного раствора.
2.2 Добавьте 5 мкл нуклеиновую кислоту отрицательного контроля, положительного контроля и образцы в указанные выше реакционные пробирки для ПЦР соответственно, центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и поместить их во флуоресцентный усилитель для количественной ПЦР.
2.3 Условия реакции устанавливаются следующим образом:
Соответствующие параметры усилителя | |||
Система | Общий объем: 30 мкл | ||
Сбор сигналов
| Птичий грипп H5/H7/H9/Общие
| Подтип H5 - канал HEX собирает сигнал флуоресценции | |
Подтип H7 - канал FAM собирает сигнал флуоресценции | |||
Подтип H9 - канал Cy5 собирает флуоресцентный сигнал | |||
Общее — канал ROX собирает флуоресцентный сигнал | |||
Условия реакции ПЦР
| Этап | Condition | Номер цикла |
Обратная транскрипция | 55 ℃: 15 минут | 1 | |
Предварительное вырождение | 95 ℃: 30 секунд | 1 | |
ПЦР
| 95 ℃: 10 секунд |
40
| |
56 ℃: 30 секунд (Установите сбор флуоресцентного сигнала в конце этого этапа) |
【Интерпретация результатов】
1. Определение эффективности тест-набора:
(1) Слабый положительный контроль: значение Ct каналов FAM, HEX, Cy5 и ROX ≤ 32, кривая амплификации с очевидной экспоненциальной фазой.
(2) Пустой контроль: каналы FAM, HEX, Cy5 и ROX не имеют кривой усиления, или кривая усиления прямая или слегка наклонная, без значительной экспоненциальной фазы и значение Ct ≥ 38 или значение Ct отсутствует.
2. Определение результатов:
Результат | FAM-канал | HEX-канал | канал Cy5 | канал РОКС |
Нуклеиновая кислота подтипа H5 вируса птичьего гриппа положительная | - | + | - | + |
Нуклеиновая кислота подтипа Н7 вируса птичьего гриппа положительная | + | - | - | + |
Нуклеиновая кислота подтипа H9 вируса птичьего гриппа положительная | - | - | + | + |
Нуклеиновая кислота подтипа H5/H7 вируса птичьего гриппа положительная | + | + | - | + |
Нуклеиновая кислота подтипа H5/H9 вируса птичьего гриппа положительная | - | + | + | + |
Нуклеиновая кислота подтипа H7/H9 вируса птичьего гриппа положительная | + | - | + | + |
Положительный результат на нуклеиновую кислоту субтипа вируса птичьего гриппа H5/H7/H9 | + | + | + | + |
Нуклеиновая кислота низкопатогенного вируса птичьего гриппа положительная | - | - | - | + |
Нуклеиновая кислота вируса птичьего гриппа отрицательная | - | - | - | - |
*Примечание:
(1) Если имеется логарифмическая кривая усиления фазы роста и значение Ct ≤ 36, это оценивается как +.Если кривая усиления отсутствует или значение Ct > 36, это оценивается как -.Образцы подозрительны, когда 36 <значение Ct<40, что требует повторного тестирования.
(2) Если результаты любого подтипа H5/H7/H9 + с каналом ROX -, его необходимо повторно протестировать.
【Меры предосторожности】
1. Управление лабораторией должно осуществляться в строгом соответствии со спецификацией управления лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывали 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
【Производство】
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810
Набор для обнаружения вируса птичьего гриппа H5/H7/H9/общих подтипов РНК (ПЦР-флуоресцентное зондирование)
【Наименование товара】
Набор для ПЦР в реальном времени для обнаружения вируса птичьего гриппа H5/H7/H9/общий подтип
【Упаковка】
50 комплектов/коробка
【Основные компоненты и содержание】
Имя | Спецификация | Количество |
H5/H7/H9/общий трехвалентный реакционный раствор | 1250 мкл/пробирка | 1 |
H5/H7/H9/общий положительный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
【Хранение и срок годности】
Хранить при -20 ± 5 ℃, повторное замораживание и оттаивание ≤ 3 раза, срок годности 12 месяцев.
【Модель】
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus и другие флуоресцентные усилители для количественной ПЦР.
【Метод испытания】
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Коммерческий набор для выделения РНК можно использовать для выделения нуклеиновых кислот, следуйте инструкциям набора.
2. усиление ПЦР
2.1 Подсчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте в каждую пробирку по 25 мкл реакционного раствора.
2.2 Добавьте 5 мкл нуклеиновую кислоту отрицательного контроля, положительного контроля и образцы в указанные выше реакционные пробирки для ПЦР соответственно, центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и поместить их во флуоресцентный усилитель для количественной ПЦР.
2.3 Условия реакции устанавливаются следующим образом:
Соответствующие параметры усилителя | |||
Система | Общий объем: 30 мкл | ||
Сбор сигналов
| Птичий грипп H5/H7/H9/Общие
| Подтип H5 - канал HEX собирает сигнал флуоресценции | |
Подтип H7 - канал FAM собирает сигнал флуоресценции | |||
Подтип H9 - канал Cy5 собирает флуоресцентный сигнал | |||
Общее — канал ROX собирает флуоресцентный сигнал | |||
Условия реакции ПЦР
| Этап | Condition | Номер цикла |
Обратная транскрипция | 55 ℃: 15 минут | 1 | |
Предварительное вырождение | 95 ℃: 30 секунд | 1 | |
ПЦР
| 95 ℃: 10 секунд |
40
| |
56 ℃: 30 секунд (Установите сбор флуоресцентного сигнала в конце этого этапа) |
【Интерпретация результатов】
1. Определение эффективности тест-набора:
(1) Слабый положительный контроль: значение Ct каналов FAM, HEX, Cy5 и ROX ≤ 32, кривая амплификации с очевидной экспоненциальной фазой.
(2) Пустой контроль: каналы FAM, HEX, Cy5 и ROX не имеют кривой усиления, или кривая усиления прямая или слегка наклонная, без значительной экспоненциальной фазы и значение Ct ≥ 38 или значение Ct отсутствует.
2. Определение результатов:
Результат | FAM-канал | HEX-канал | канал Cy5 | канал РОКС |
Нуклеиновая кислота подтипа H5 вируса птичьего гриппа положительная | - | + | - | + |
Нуклеиновая кислота подтипа Н7 вируса птичьего гриппа положительная | + | - | - | + |
Нуклеиновая кислота подтипа H9 вируса птичьего гриппа положительная | - | - | + | + |
Нуклеиновая кислота подтипа H5/H7 вируса птичьего гриппа положительная | + | + | - | + |
Нуклеиновая кислота подтипа H5/H9 вируса птичьего гриппа положительная | - | + | + | + |
Нуклеиновая кислота подтипа H7/H9 вируса птичьего гриппа положительная | + | - | + | + |
Положительный результат на нуклеиновую кислоту субтипа вируса птичьего гриппа H5/H7/H9 | + | + | + | + |
Нуклеиновая кислота низкопатогенного вируса птичьего гриппа положительная | - | - | - | + |
Нуклеиновая кислота вируса птичьего гриппа отрицательная | - | - | - | - |
*Примечание:
(1) Если имеется логарифмическая кривая усиления фазы роста и значение Ct ≤ 36, это оценивается как +.Если кривая усиления отсутствует или значение Ct > 36, это оценивается как -.Образцы подозрительны, когда 36 <значение Ct<40, что требует повторного тестирования.
(2) Если результаты любого подтипа H5/H7/H9 + с каналом ROX -, его необходимо повторно протестировать.
【Меры предосторожности】
1. Управление лабораторией должно осуществляться в строгом соответствии со спецификацией управления лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывали 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
【Производство】
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810