 |
Набор для обнаружения вируса африканской чумы свиней методом ПЦР в реальном времени (MGF/CD2V/VP72)
【Наименование товара】
Набор для обнаружения вируса африканской чумы свиней методом ПЦР в реальном времени (MGF/CD2V/VP72)
【Упаковка】
50 комплектов/коробка
【Основные компоненты и содержание】
Имя | Спецификация | Количество |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) Реакция Раствор | 1000 мкл/пробирка | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) Положительный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
【Хранение и срок годности】
Хранится при -20 ± 5 ℃
, Повторное замораживание и оттаивание ≤ 3 раза, срок годности 12 месяцев.
【Метод испытания】
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Коммерческий набор для выделения ДНК может быть использован для выделения нуклеиновых кислот, пожалуйста, следуйте инструкциям набора.
2. усиление ПЦР
2.1 Подсчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте в каждую пробирку по 20 мкл реакционного раствора.
2.2 Добавьте 5 мкл л нуклеиновой кислоты отрицательного контроля, положительного контроля и образцов в указанные выше реакционные пробирки для ПЦР соответственно, центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и поместить их во флуоресцентный усилитель для количественной ПЦР.
2.3 Условия реакции устанавливаются следующим образом:
Соответствующие параметры усилителя | |||
Система | Общий объем: 30 мкл | ||
Сбор сигналов
| Флуоресцентный сигнал ASFV (MGF/CD2V/VP72)
| Канал VP72-FAM собирает сигнал флуоресценции | |
Канал CD2V-VIC/HEX собирает сигнал флуоресценции | |||
Канал MGF-CY5 собирает сигнал флуоресценции | |||
Условия реакции ПЦР
| Этап | Condition | Номер цикла |
UNG-обработка | 37 ℃: 2 минуты | 1 | |
Предварительное вырождение | 95 ℃: 30 секунд | 1 | |
ПЦР
| 95 ℃: 10 секунд |
40
| |
56 ℃: 30 секунд (Установите сбор флуоресцентного сигнала в конце этого этапа) | |||
【Интерпретация результатов】
1. Определение эффективности тест-набора:
(1) Положительный контроль: значение Ct каналов FAM, HEX/VIC и CY5 ≤ 32, кривая амплификации с очевидной экспоненциальной фазой.
(2) Отрицательный контроль: каналы FAM, HEX/VIC и CY5 не имеют кривой амплификации, или кривая амплификации прямая или слегка наклонная, нет значительной экспоненциальной фазы и значение Ct ≥ 38 или значение Ct отсутствует.
2. Определение результатов:
Результат | FAM-канал | HEX/VIC канал | канал CY5 |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте вируса АЧС VP72 | + | - | - |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте CD2V ASFV | - | + | - |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте MGF ASFV | - | - | + |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте VP72 и CD2V вируса АЧС | + | + | - |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте VP72 и MGF ASFV | + | - | + |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте CD2V и MGF ASFV | - | + | + |
Нуклеиновая кислота MGF, CD2V и VP72 ASFV положительная | + | + | + |
Нуклеиновая кислота MGF, CD2V и VP72 ASFV отрицательная | - | - | - |
*Примечание:
(1) Если имеется логарифмическая кривая усиления фазы роста и значение Ct ≤ 35, это оценивается как +.Если кривая усиления отсутствует или значение Ct > 38, это оценивается как -.Образцы подозрительны, если 35 < значение Ct < 38, что требует повторного тестирования.Если значение Ct повторно протестированного результата все еще находится в пределах 35-38 с очевидной логарифмической фазой роста, оно оценивается как положительное, в противном случае отрицательное.
【Меры предосторожности】
1. Управление лабораторией должно осуществляться в строгом соответствии со спецификацией управления лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывали 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
【Производство】
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810
Набор для обнаружения вируса африканской чумы свиней методом ПЦР в реальном времени (MGF/CD2V/VP72)
【Наименование товара】
Набор для обнаружения вируса африканской чумы свиней методом ПЦР в реальном времени (MGF/CD2V/VP72)
【Упаковка】
50 комплектов/коробка
【Основные компоненты и содержание】
Имя | Спецификация | Количество |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) Реакция Раствор | 1000 мкл/пробирка | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) Положительный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
【Хранение и срок годности】
Хранится при -20 ± 5 ℃
, Повторное замораживание и оттаивание ≤ 3 раза, срок годности 12 месяцев.
【Метод испытания】
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Коммерческий набор для выделения ДНК может быть использован для выделения нуклеиновых кислот, пожалуйста, следуйте инструкциям набора.
2. усиление ПЦР
2.1 Подсчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте в каждую пробирку по 20 мкл реакционного раствора.
2.2 Добавьте 5 мкл л нуклеиновой кислоты отрицательного контроля, положительного контроля и образцов в указанные выше реакционные пробирки для ПЦР соответственно, центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и поместить их во флуоресцентный усилитель для количественной ПЦР.
2.3 Условия реакции устанавливаются следующим образом:
Соответствующие параметры усилителя | |||
Система | Общий объем: 30 мкл | ||
Сбор сигналов
| Флуоресцентный сигнал ASFV (MGF/CD2V/VP72)
| Канал VP72-FAM собирает сигнал флуоресценции | |
Канал CD2V-VIC/HEX собирает сигнал флуоресценции | |||
Канал MGF-CY5 собирает сигнал флуоресценции | |||
Условия реакции ПЦР
| Этап | Condition | Номер цикла |
UNG-обработка | 37 ℃: 2 минуты | 1 | |
Предварительное вырождение | 95 ℃: 30 секунд | 1 | |
ПЦР
| 95 ℃: 10 секунд |
40
| |
56 ℃: 30 секунд (Установите сбор флуоресцентного сигнала в конце этого этапа) | |||
【Интерпретация результатов】
1. Определение эффективности тест-набора:
(1) Положительный контроль: значение Ct каналов FAM, HEX/VIC и CY5 ≤ 32, кривая амплификации с очевидной экспоненциальной фазой.
(2) Отрицательный контроль: каналы FAM, HEX/VIC и CY5 не имеют кривой амплификации, или кривая амплификации прямая или слегка наклонная, нет значительной экспоненциальной фазы и значение Ct ≥ 38 или значение Ct отсутствует.
2. Определение результатов:
Результат | FAM-канал | HEX/VIC канал | канал CY5 |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте вируса АЧС VP72 | + | - | - |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте CD2V ASFV | - | + | - |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте MGF ASFV | - | - | + |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте VP72 и CD2V вируса АЧС | + | + | - |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте VP72 и MGF ASFV | + | - | + |
Положительный результат по нуклеиновой кислоте CD2V и MGF ASFV | - | + | + |
Нуклеиновая кислота MGF, CD2V и VP72 ASFV положительная | + | + | + |
Нуклеиновая кислота MGF, CD2V и VP72 ASFV отрицательная | - | - | - |
*Примечание:
(1) Если имеется логарифмическая кривая усиления фазы роста и значение Ct ≤ 35, это оценивается как +.Если кривая усиления отсутствует или значение Ct > 38, это оценивается как -.Образцы подозрительны, если 35 < значение Ct < 38, что требует повторного тестирования.Если значение Ct повторно протестированного результата все еще находится в пределах 35-38 с очевидной логарифмической фазой роста, оно оценивается как положительное, в противном случае отрицательное.
【Меры предосторожности】
1. Управление лабораторией должно осуществляться в строгом соответствии со спецификацией управления лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывали 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
【Производство】
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810
