 |
Набор для обнаружения микобактерий паратуберкулеза методом ПЦР в реальном времени
【Наименование товара】Набор для обнаружения микобактерий паратуберкулеза методом ПЦР в реальном времени
【Упаковка】50 тестов
【Индикация】Набор для обнаружения Mycobacterium Paratuberculosis с помощью ПЦР в реальном времени применим для обнаружения РНК Mycobacterium Paratuberculosis в образцах носового мазка, молока, суставной жидкости.Результаты теста предназначены только для исследовательских целей, а не для клинической диагностики.
【Основные компоненты и содержание】
Имя | Спецификация | Количество |
Реакционный раствор PMB | 1000 мкл/пробирка | 1 |
Положительный контроль ПМБ | 250 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
【Хранение и срок годности】
Хранить при температуре -20 ± 5 ℃, повторно замораживать и оттаивать ≤ 3 раза, срок годности составляет 12 месяцев.
【Метод испытания】
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Коммерческий набор для выделения РНК можно использовать для выделения нуклеиновых кислот, следуйте инструкциям набора.
2. ПЦР-амплификация (пример ABI 7500, см. эту операцию и руководство для ABI 7300 и LC480).
2.1 Рассчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте 20 мкл реакционного раствора в каждую пробирку.
2.2 Добавьте 5 мкл нуклеиновой кислоты отрицательного контроля, положительного контроля и образцов в вышеуказанные реакционные пробирки PRC соответственно, центрифугируйте при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и поместите их в усилитель флуоресцентной количественной ПЦР.
3. усиление qRT-PCR
3.1 Канал флуоресцентного сигнала: Режим обнаружения зонда установлен следующим образом: Репортерный краситель 1: FAM и гасящий краситель: НЕТ.
3.2 Условия реакции должны быть установлены как:
Параметры усиления | |||
Система | Общий объем 25 мкл. | ||
Условия реакции ПЦР | Фаза | Условия | Циклы |
UNG-процесс | 37 ℃ в течение 2 минут | 1 | |
Предварительная денатурация | 95 ℃ в течение 30 секунд | 1 | |
ПЦР | 95 ℃ в течение 10 секунд |
40 | |
60 ℃ в течение 30 секунд Установите для сбора флуоресцентного сигнала в конец этой фазы | |||
【Интерпретация результатов】
1. Оценка действительности:
1.1 Положительный контроль: значение Ct канала FAM ≤ 32, а кривая амплификации имеет значительную фазу экспоненциального роста.
1.2 Отрицательный контроль: Канал FAM не имеет кривой усиления, либо кривая усиления представляет собой прямую или слегка наклонную линию.
2. Оценка результатов теста:
Если канал обнаружения FAM тестируемого образца нет кривой усиления, можно определить как ПМБ отрицательный.
Если канал детектирования FAM имеет экспоненциально растущую кривую усиления и значение Ct ≤ 36, можно определить как ПМБ положительный.
36 образцы следует рассматривать как сомнительные результаты, и анализ следует повторить для подтверждения.
【Меры предосторожности】
1. Управление лабораторией должно осуществляться в строгом соответствии со спецификацией управления лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После проведения эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывают 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
【Производство】
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун.
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810
Набор для обнаружения микобактерий паратуберкулеза методом ПЦР в реальном времени
【Наименование товара】Набор для обнаружения микобактерий паратуберкулеза методом ПЦР в реальном времени
【Упаковка】50 тестов
【Индикация】Набор для обнаружения Mycobacterium Paratuberculosis с помощью ПЦР в реальном времени применим для обнаружения РНК Mycobacterium Paratuberculosis в образцах носового мазка, молока, суставной жидкости.Результаты теста предназначены только для исследовательских целей, а не для клинической диагностики.
【Основные компоненты и содержание】
Имя | Спецификация | Количество |
Реакционный раствор PMB | 1000 мкл/пробирка | 1 |
Положительный контроль ПМБ | 250 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
【Хранение и срок годности】
Хранить при температуре -20 ± 5 ℃, повторно замораживать и оттаивать ≤ 3 раза, срок годности составляет 12 месяцев.
【Метод испытания】
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Коммерческий набор для выделения РНК можно использовать для выделения нуклеиновых кислот, следуйте инструкциям набора.
2. ПЦР-амплификация (пример ABI 7500, см. эту операцию и руководство для ABI 7300 и LC480).
2.1 Рассчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте 20 мкл реакционного раствора в каждую пробирку.
2.2 Добавьте 5 мкл нуклеиновой кислоты отрицательного контроля, положительного контроля и образцов в вышеуказанные реакционные пробирки PRC соответственно, центрифугируйте при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и поместите их в усилитель флуоресцентной количественной ПЦР.
3. усиление qRT-PCR
3.1 Канал флуоресцентного сигнала: Режим обнаружения зонда установлен следующим образом: Репортерный краситель 1: FAM и гасящий краситель: НЕТ.
3.2 Условия реакции должны быть установлены как:
Параметры усиления | |||
Система | Общий объем 25 мкл. | ||
Условия реакции ПЦР | Фаза | Условия | Циклы |
UNG-процесс | 37 ℃ в течение 2 минут | 1 | |
Предварительная денатурация | 95 ℃ в течение 30 секунд | 1 | |
ПЦР | 95 ℃ в течение 10 секунд |
40 | |
60 ℃ в течение 30 секунд Установите для сбора флуоресцентного сигнала в конец этой фазы | |||
【Интерпретация результатов】
1. Оценка действительности:
1.1 Положительный контроль: значение Ct канала FAM ≤ 32, а кривая амплификации имеет значительную фазу экспоненциального роста.
1.2 Отрицательный контроль: Канал FAM не имеет кривой усиления, либо кривая усиления представляет собой прямую или слегка наклонную линию.
2. Оценка результатов теста:
Если канал обнаружения FAM тестируемого образца нет кривой усиления, можно определить как ПМБ отрицательный.
Если канал детектирования FAM имеет экспоненциально растущую кривую усиления и значение Ct ≤ 36, можно определить как ПМБ положительный.
36 образцы следует рассматривать как сомнительные результаты, и анализ следует повторить для подтверждения.
【Меры предосторожности】
1. Управление лабораторией должно осуществляться в строгом соответствии со спецификацией управления лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После проведения эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывают 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
【Производство】
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун.
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810
