 |
Набор для обнаружения Mycoplasma Synoviae методом ПЦР в реальном времени
【Наименование товара】Набор для обнаружения Mycoplasma Synoviae (MS) методом ПЦР в реальном времени
【Упаковка】50 комплектов/коробка
【Индикация】Набор для обнаружения Mycoplasma Synoviae методом ПЦР в реальном времени применим для обнаружения ДНК Mycoplasma Synoviae в образцах из дыхательных путей птиц, ткани легких и других образцах.Результаты теста предназначены только для исследовательских целей, а не для клинической диагностики.
【Основные компоненты и содержание】
Имя | Спецификация | Количество |
Раствор двойной реакции МС | 900 мкл/пробирка | 1 |
Двойной положительный контроль МС | 100 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 100 мкл/пробирка | 1 |
【Хранение и срок годности】
Хранить при температуре -20 ± 5 ℃, повторно замораживать и оттаивать ≤ 3 раза, срок годности составляет 12 месяцев.
【Теория】
Этот набор основан на технологии флуоресцентной ПЦР в реальном времени. Он выбирает дикий вирус Mycoplasma Synoviaes и консервативную область вакцинного штамма MS-H в качестве областей-мишеней для амплификации, конструирует специфические зонды-праймеры и маркирует различные флуоресцентные группы, а также проводит качественные анализы. обнаружение Mycoplasma Synoviae с помощью одноэтапной амплификации флуоресцентной ПЦР в реальном времени. В дополнение к конкретным праймерам и флуоресцентным зондам реакционная система также оснащена соответствующим ПЦР-буфером, ферментом Taq.dNTP, Mg2+ и другие компоненты, с помощью которых можно добиться чувствительного и специфичного обнаружения нуклеиновой кислоты MS, а также идентифицировать дикий вирус и вакцинный штамм MS-H.
【Инструмент】 ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 или другие аналогичные флуоресцентные инструменты для количественной ПЦР.
【Требование к образцу】
Образцы дыхательных путей и образцы легких.
【Метод испытания】
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Коммерческий набор для выделения ДНК может быть использован для выделения нуклеиновых кислот, пожалуйста, следуйте инструкциям набора.
2. ПЦР-амплификация
2.1 Подсчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте в каждую пробирку по 18 мкл реакционного раствора.
2.2 Добавьте 2 мкл нуклеиновой кислоты отрицательного контроля, положительного контроля и образцов нуклеиновой кислоты в вышеуказанные реакционные пробирки PRC соответственно, центрифугируйте при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и поместите их в усилитель флуоресцентной количественной ПЦР.
3. усиление qR-T-PCR
3.1 Выбор канала флуоресценции
Reporter Dye1: выберите канал FAM для обнаружения вакцинного штамма MS-H, Quencher Dye: НЕТ
Reporter Dye2: выберите канал VIC или HEX для обнаружения штамма дикого вируса MS, Quencher Dye2: НЕТ, пассивный эталон: НЕТ.Информацию о других приборах см. в руководстве по эксплуатации.
3.2 Условия реакции задаются следующим образом:
Параметры усиления | |||
Система | Общий объем 25 мкл. | ||
Условия реакции ПЦР | Фаза | Условия | Циклы |
Предварительная денатурация | 95 ℃ в течение 5 минут | 1 | |
ПЦР | 95 ℃ в течение 10 секунд |
40 | |
60 ℃ в течение 30 секунд | |||
【Интерпретация результатов】
1. Следующие требования должны быть соблюдены одновременно в одном эксперименте, в противном случае эксперимент считается недействительным и его необходимо повторить.
Отрицательный контроль не имел кривой амплификации
Кривая амплификации канала FAM положительного контроля имела значительную логарифмическую фазу роста, а значение Ct кривой амплификации канала FAM составляло ≤ 32.
2. Если канал FAM тестируемого образца не имеет кривой амплификации, образец может быть определен как отрицательный на IBDV.Если канал FAM имеет логарифмическую кривую усиления фазы роста и значение Ct ≤ 36, это можно определить как положительный IBDV.36 < значение Ct < 40 — подозрительные образцы, которые необходимо повторно протестировать для подтверждения.
【Меры предосторожности】
1. Управление лабораторией должно осуществляться в строгом соответствии со спецификацией управления лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывали 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
【Производство】
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун.
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810
Набор для обнаружения Mycoplasma Synoviae методом ПЦР в реальном времени
【Наименование товара】Набор для обнаружения Mycoplasma Synoviae (MS) методом ПЦР в реальном времени
【Упаковка】50 комплектов/коробка
【Индикация】Набор для обнаружения Mycoplasma Synoviae методом ПЦР в реальном времени применим для обнаружения ДНК Mycoplasma Synoviae в образцах из дыхательных путей птиц, ткани легких и других образцах.Результаты теста предназначены только для исследовательских целей, а не для клинической диагностики.
【Основные компоненты и содержание】
Имя | Спецификация | Количество |
Раствор двойной реакции МС | 900 мкл/пробирка | 1 |
Двойной положительный контроль МС | 100 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 100 мкл/пробирка | 1 |
【Хранение и срок годности】
Хранить при температуре -20 ± 5 ℃, повторно замораживать и оттаивать ≤ 3 раза, срок годности составляет 12 месяцев.
【Теория】
Этот набор основан на технологии флуоресцентной ПЦР в реальном времени. Он выбирает дикий вирус Mycoplasma Synoviaes и консервативную область вакцинного штамма MS-H в качестве областей-мишеней для амплификации, конструирует специфические зонды-праймеры и маркирует различные флуоресцентные группы, а также проводит качественные анализы. обнаружение Mycoplasma Synoviae с помощью одноэтапной амплификации флуоресцентной ПЦР в реальном времени. В дополнение к конкретным праймерам и флуоресцентным зондам реакционная система также оснащена соответствующим ПЦР-буфером, ферментом Taq.dNTP, Mg2+ и другие компоненты, с помощью которых можно добиться чувствительного и специфичного обнаружения нуклеиновой кислоты MS, а также идентифицировать дикий вирус и вакцинный штамм MS-H.
【Инструмент】 ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 или другие аналогичные флуоресцентные инструменты для количественной ПЦР.
【Требование к образцу】
Образцы дыхательных путей и образцы легких.
【Метод испытания】
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Коммерческий набор для выделения ДНК может быть использован для выделения нуклеиновых кислот, пожалуйста, следуйте инструкциям набора.
2. ПЦР-амплификация
2.1 Подсчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте в каждую пробирку по 18 мкл реакционного раствора.
2.2 Добавьте 2 мкл нуклеиновой кислоты отрицательного контроля, положительного контроля и образцов нуклеиновой кислоты в вышеуказанные реакционные пробирки PRC соответственно, центрифугируйте при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и поместите их в усилитель флуоресцентной количественной ПЦР.
3. усиление qR-T-PCR
3.1 Выбор канала флуоресценции
Reporter Dye1: выберите канал FAM для обнаружения вакцинного штамма MS-H, Quencher Dye: НЕТ
Reporter Dye2: выберите канал VIC или HEX для обнаружения штамма дикого вируса MS, Quencher Dye2: НЕТ, пассивный эталон: НЕТ.Информацию о других приборах см. в руководстве по эксплуатации.
3.2 Условия реакции задаются следующим образом:
Параметры усиления | |||
Система | Общий объем 25 мкл. | ||
Условия реакции ПЦР | Фаза | Условия | Циклы |
Предварительная денатурация | 95 ℃ в течение 5 минут | 1 | |
ПЦР | 95 ℃ в течение 10 секунд |
40 | |
60 ℃ в течение 30 секунд | |||
【Интерпретация результатов】
1. Следующие требования должны быть соблюдены одновременно в одном эксперименте, в противном случае эксперимент считается недействительным и его необходимо повторить.
Отрицательный контроль не имел кривой амплификации
Кривая амплификации канала FAM положительного контроля имела значительную логарифмическую фазу роста, а значение Ct кривой амплификации канала FAM составляло ≤ 32.
2. Если канал FAM тестируемого образца не имеет кривой амплификации, образец может быть определен как отрицательный на IBDV.Если канал FAM имеет логарифмическую кривую усиления фазы роста и значение Ct ≤ 36, это можно определить как положительный IBDV.36 < значение Ct < 40 — подозрительные образцы, которые необходимо повторно протестировать для подтверждения.
【Меры предосторожности】
1. Управление лабораторией должно осуществляться в строгом соответствии со спецификацией управления лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывали 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
【Производство】
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун.
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810
