штат: | |
---|---|
Rуголь-time PCR Detection Kit для эпидемической диареи свиней, трансмиссивного гастроэнтерита, вируса дельтакоронавирусной болезни свиней и ротавируса свиней
[Наименование товара] Набор для обнаружения эпидемической диареи свиней, трансмиссивного гастроэнтерита, вируса дельтакоронавирусной болезни свиней и ротавируса свиней методом ПЦР в реальном времени
[Упаковка] 50 тестов
[Индикация] Набор для обнаружения эпидемической диареи свиней, трансмиссивного гастроэнтерита, вируса дельтакоронавирусной болезни свиней и ротавируса в режиме реального времени для обнаружения, типирования, вспомогательной диагностики и эпидемиологического исследования PED/TGEV/PDCoV/RV в свиной сыворотке, плазме, тканях кишечника , кишечное содержимое, мезентериальные лимфатические узлы, экскременты и другие образцы.Результаты теста предназначены только для исследовательских целей, а не для клинической диагностики.
[Основные компоненты и содержание]
Имя | Спецификация | Количество |
Реакция PED/TGEV/PDCoV/RV | 1000 мкл/пробирка | 1 |
PED/TGEV/PDCoV/RV Положительный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
[Хранение и срок годности]
Хранить при -20 ± 5 ℃, повторное замораживание и оттаивание ≤ 3 раза, срок годности 12 месяцев.
[Модель]
Для ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus и других термоциклеров.
[Метод испытания]
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Для выделения нуклеиновых кислот можно использовать имеющийся в продаже набор для выделения ДНК/РНК, следуйте инструкциям к набору.
2. ПЦР-амплификация
2.1 Рассчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте 20мкл до реакционного раствора в каждую пробирку.
2.2 Добавить 5 мкл нуклеиновую кислоту отрицательного контроля, положительного контроля и образцы в вышеупомянутые реакционные пробирки PRC соответственно, центрифугируют при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и помещают их в термоциклер.
2.3 Условия реакции устанавливаются следующим образом:
Соответствующие параметры усилителя | |||
Система | Общий объем: 30 мкл | ||
Сбор сигналов | Четырехвалентный флуоресцентный сигнал PED/TGEV/PDCoV/RV | Трансмиссивный гастроэнтерит (TGEV) - канал HEX собирает флуоресцентный сигнал | |
Эпидемическая диарея свиней (PED) - канал FAM собирает флуоресцентный сигнал | |||
Вирус дельтакоронавирусной болезни свиней (PDCoV) - канал Cy5 собирает сигнал флуоресценции | |||
Ротавирус свиней (RV) - канал ROX собирает сигнал флуоресценции | |||
Условия реакции ПЦР | Этап | Condition | Номер цикла |
Обратная транскрипция | 55 ℃: 15 минут | 1 | |
Предварительное вырождение | 95 ℃: 30 секунд | 1 | |
ПЦР | 95 ℃: 10 секунд |
40 | |
60 ℃: 30 секунд (Установите сбор флуоресцентного сигнала в конце этого этапа) |
[Интерпретация результатов]
1. Определение эффективности тест-набора:
(1) Положительный контроль: значение Ct каналов FAM, HEX, Cy5 и ROX ≤ 32, кривая амплификации с очевидной экспоненциальной фазой.
(2) Отрицательный контроль: каналы FAM, HEX, Cy5 и ROX не имеют кривой амплификации или кривая амплификации прямая или слегка наклонная.
2. Определение результатов:
Результат | FAM-канал | HEX-канал | канал Cy5 | канал РОКС |
TGEV кислотно-положительный | - | + | - | - |
Нуклеиновая кислота PED положительная | + | - | - | - |
Нуклеиновая кислота PDCoV положительная | - | - | + | - |
Нуклеиновая кислота RV положительная | - | - | - | + |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам TGEV и PED | + | + | - | - |
Нуклеиновые кислоты TGEV и PDCoV положительные | - | + | + | - |
Нуклеиновые кислоты PED и PDCoV положительны | + | - | + | - |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам TGEV и RV | - | + | - | + |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам PED и RV | + | - | - | + |
Положительный результат на нуклеиновые кислоты PDCoV и RV | - | - | + | + |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам TGEV, PED и RV | + | + | - | + |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам TGEV, PDCoV и RV | + | - | + | + |
Положительный результат на нуклеиновые кислоты PED, PDCoV и RV | - | + | + | + |
Нуклеиновые кислоты TGEV, PED и PDCoV положительные | + | + | + | - |
TGEV, PED, PDCoV и нуклеиновая кислота RV положительные | + | + | + | + |
Отрицательные нуклеиновые кислоты TGEV, PED, PDCoV и RV | - | - | - | - |
*Примечание:
Если имеется кривая усиления экспоненциального роста и значение Ct ≤ 36, оно определяется как '+'.
Если кривой усиления нет, она определяется как '-'.
Если 36 < Ct Value < 40, это сомнительный образец, и анализ следует повторить для подтверждения.
[Меры предосторожности]
1. Руководство лаборатории должно строго следовать спецификациям руководства лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После проведения эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывают 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
[Производство]
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун.
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810
Rуголь-time PCR Detection Kit для эпидемической диареи свиней, трансмиссивного гастроэнтерита, вируса дельтакоронавирусной болезни свиней и ротавируса свиней
[Наименование товара] Набор для обнаружения эпидемической диареи свиней, трансмиссивного гастроэнтерита, вируса дельтакоронавирусной болезни свиней и ротавируса свиней методом ПЦР в реальном времени
[Упаковка] 50 тестов
[Индикация] Набор для обнаружения эпидемической диареи свиней, трансмиссивного гастроэнтерита, вируса дельтакоронавирусной болезни свиней и ротавируса в режиме реального времени для обнаружения, типирования, вспомогательной диагностики и эпидемиологического исследования PED/TGEV/PDCoV/RV в свиной сыворотке, плазме, тканях кишечника , кишечное содержимое, мезентериальные лимфатические узлы, экскременты и другие образцы.Результаты теста предназначены только для исследовательских целей, а не для клинической диагностики.
[Основные компоненты и содержание]
Имя | Спецификация | Количество |
Реакция PED/TGEV/PDCoV/RV | 1000 мкл/пробирка | 1 |
PED/TGEV/PDCoV/RV Положительный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
Отрицательный контроль | 250 мкл/пробирка | 1 |
[Хранение и срок годности]
Хранить при -20 ± 5 ℃, повторное замораживание и оттаивание ≤ 3 раза, срок годности 12 месяцев.
[Модель]
Для ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus и других термоциклеров.
[Метод испытания]
1. Экстракция нуклеиновой кислоты
Для выделения нуклеиновых кислот можно использовать имеющийся в продаже набор для выделения ДНК/РНК, следуйте инструкциям к набору.
2. ПЦР-амплификация
2.1 Рассчитайте количество тестовых образцов, возьмите n+2 реакционных пробирки для ПЦР и добавьте 20мкл до реакционного раствора в каждую пробирку.
2.2 Добавить 5 мкл нуклеиновую кислоту отрицательного контроля, положительного контроля и образцы в вышеупомянутые реакционные пробирки PRC соответственно, центрифугируют при 8000 об/мин в течение нескольких секунд и помещают их в термоциклер.
2.3 Условия реакции устанавливаются следующим образом:
Соответствующие параметры усилителя | |||
Система | Общий объем: 30 мкл | ||
Сбор сигналов | Четырехвалентный флуоресцентный сигнал PED/TGEV/PDCoV/RV | Трансмиссивный гастроэнтерит (TGEV) - канал HEX собирает флуоресцентный сигнал | |
Эпидемическая диарея свиней (PED) - канал FAM собирает флуоресцентный сигнал | |||
Вирус дельтакоронавирусной болезни свиней (PDCoV) - канал Cy5 собирает сигнал флуоресценции | |||
Ротавирус свиней (RV) - канал ROX собирает сигнал флуоресценции | |||
Условия реакции ПЦР | Этап | Condition | Номер цикла |
Обратная транскрипция | 55 ℃: 15 минут | 1 | |
Предварительное вырождение | 95 ℃: 30 секунд | 1 | |
ПЦР | 95 ℃: 10 секунд |
40 | |
60 ℃: 30 секунд (Установите сбор флуоресцентного сигнала в конце этого этапа) |
[Интерпретация результатов]
1. Определение эффективности тест-набора:
(1) Положительный контроль: значение Ct каналов FAM, HEX, Cy5 и ROX ≤ 32, кривая амплификации с очевидной экспоненциальной фазой.
(2) Отрицательный контроль: каналы FAM, HEX, Cy5 и ROX не имеют кривой амплификации или кривая амплификации прямая или слегка наклонная.
2. Определение результатов:
Результат | FAM-канал | HEX-канал | канал Cy5 | канал РОКС |
TGEV кислотно-положительный | - | + | - | - |
Нуклеиновая кислота PED положительная | + | - | - | - |
Нуклеиновая кислота PDCoV положительная | - | - | + | - |
Нуклеиновая кислота RV положительная | - | - | - | + |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам TGEV и PED | + | + | - | - |
Нуклеиновые кислоты TGEV и PDCoV положительные | - | + | + | - |
Нуклеиновые кислоты PED и PDCoV положительны | + | - | + | - |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам TGEV и RV | - | + | - | + |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам PED и RV | + | - | - | + |
Положительный результат на нуклеиновые кислоты PDCoV и RV | - | - | + | + |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам TGEV, PED и RV | + | + | - | + |
Положительный результат по нуклеиновым кислотам TGEV, PDCoV и RV | + | - | + | + |
Положительный результат на нуклеиновые кислоты PED, PDCoV и RV | - | + | + | + |
Нуклеиновые кислоты TGEV, PED и PDCoV положительные | + | + | + | - |
TGEV, PED, PDCoV и нуклеиновая кислота RV положительные | + | + | + | + |
Отрицательные нуклеиновые кислоты TGEV, PED, PDCoV и RV | - | - | - | - |
*Примечание:
Если имеется кривая усиления экспоненциального роста и значение Ct ≤ 36, оно определяется как '+'.
Если кривой усиления нет, она определяется как '-'.
Если 36 < Ct Value < 40, это сомнительный образец, и анализ следует повторить для подтверждения.
[Меры предосторожности]
1. Руководство лаборатории должно строго следовать спецификациям руководства лаборатории амплификации генов ПЦР.Персонал лаборатории должен пройти профессиональную подготовку.Процесс эксперимента должен проводиться строго в разных зонах (зона приготовления реагентов, зона пробоподготовки, зона амплификации и анализа продукта).Все расходные материалы должны быть одноразовыми после стерилизации.Использование специальной аппаратуры, оборудования и расходных материалов на каждом этапе проведения эксперимента не допускается.
2. Пожалуйста, подготовьте бокс биологической безопасности к этапу подготовки реагентов и образцов.Во время эксперимента необходимо иметь при себе лабораторный халат, одноразовые перчатки и пипетку.
3. По возможности следует избегать повторного замораживания и оттаивания реагентов.Перед использованием реагенты необходимо полностью разморозить и центрифугировать при 8000 об/мин в течение нескольких секунд.
4. Поместите пипетку, используемую в зоне подготовки образцов, в контейнер с дезинфицирующим средством и выбросьте вместе с отходами после стерилизации.
5. После проведения эксперимента рабочий стол и пипетку обрабатывают 10% гипохлоритом или 75% спиртом или ультрафиолетовой лампой.
[Производство]
Имя: Шаньдун Синда Джин Технологии Лтд
Дочерняя компания Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Адрес: Здание B2, промышленный парк Бандаохуигу, улица Шунгэн, город Чжучэн, провинция Шаньдун.
Почтовый индекс: 262233
Телефон: +86 - 0532 5882 0810